Dysgu am golofnau cromatograffig labordy

YColofn CromatograffigMae techneg gwahanu yn seiliedig ar y cyfernodau rhaniad gwahanol rhwng y cyfnod sefydlog a'r cyfnod symudol yn y gymysgedd. Mae'r cyfnod llonydd fel arfer yn adsorbent, fel gel silica, alwmina, polyamid, ac ati, sy'n cael ei lenwi'n gyfartal yn y golofn cromatograffig. Y cam symudol yw'r toddydd sy'n dod â'r gymysgedd i'r golofn cromatograffig, a elwir hefyd yn elifiant. Wrth i'r cyfnod symudol symud yn y golofn cromatograffig, mae pob cydran yn aros ar y cyfnod sefydlog ar gyfer gwahanol amser oherwydd gwahaniaeth cyfernod rhaniad, er mwyn cyflawni gwahaniad.

Fel offeryn gwahanu pwysig, mae colofn cromatograffig labordy yn chwarae rhan hanfodol mewn meysydd cemegol, biolegol, fferyllol a meysydd eraill. Yn seiliedig ar egwyddor cromatograffeg, gellir gwireddu gwahanu pob cydran yn y gymysgedd yn effeithiol trwy ddefnyddio gwahaniaeth cyfernod y rhaniad, gallu arsugniad a hydoddedd gwahanol sylweddau rhwng y cyfnod sefydlog a'r cyfnod symudol. Bydd y papur hwn yn cyflwyno'r egwyddor sylfaenol, y math, y dull dethol, y weithdrefn weithredu a'i chymhwyso mewn amrywiol feysydd o golofn cromatograffig labordy yn fanwl.

Gellir rhannu colofnau cromatograffig labordy yn sawl math yn ôl eu hegwyddor gweithredu, llenwi deunydd, siâp a maint.

◆ Dosbarthiad yn ôl egwyddor gweithredu

1) Cromatograffeg colofn arsugniad: Defnyddir yr adsorbent i wahanu'r gwahaniaeth yng nghapasiti arsugniad pob cydran o'r gymysgedd. Mae'r dewis o adsorbent yn dibynnu ar natur y sylwedd sydd i'w wahanu, fel gel silica yn addas ar gyfer gwahanu cyfansoddion nad ydynt yn begynol a pegynol, ac mae alwmina yn addas ar gyfer gwahanol fathau o gyfansoddion yn ôl asid ac alcali.

2) Cromatograffeg Colofn Rhaniad: Mae'r gymysgedd yn cael ei wahanu yn ôl y gwahaniaeth yng nghyfernod rhaniad rhwng y cyfnodau sefydlog a symudol. Mae cromatograffeg colofn rhaniad fel arfer yn defnyddio system doddydd fel y cyfnod symudol ac yn addasu cyfernod y rhaniad trwy newid cyfansoddiad y toddydd.

3) Cromatograffeg Colofn Cyfnewid ION: Mae arsugniad a rhyddhau ïonau yn y gymysgedd yn cael ei wahanu gan resin cyfnewid ïon. Mae gan resinau cyfnewid ïon grwpiau cyfnewid ïon penodol sy'n gallu cyfnewid ïonau yn y sylwedd sydd wedi'u gwahanu.

◆ Trefnu trwy lenwi deunydd

1) Colofn Gel Silica: Mae gel silica yn adsorbent a ddefnyddir yn gyffredin, sy'n addas ar gyfer gwahanu amrywiaeth o ddeunydd organig. Mae gan golofnau silicon sefydlogrwydd thermol a chemegol rhagorol a gellir eu defnyddio dros ystod pH eang.

2) Colofn alwmina: Rhennir colofn alwmina yn golofn alwmina asidig, alcalïaidd a niwtral yn ôl asid ac alcali, sy'n addas ar gyfer gwahanol fathau o wahaniad cyfansawdd. Mae gan golofn alwmina allu arsugniad cryf ar gyfer sylweddau pegynol.

3) Colofn polyamid: Mae gan y golofn polyamid swyddogaeth cromatograffeg arsugniad a chromatograffeg rhaniad, ac mae'n addas ar gyfer gwahanu cyfansoddion a all ffurfio bondiau hydrogen â polyamid, fel ffenolau, asidau, cwinau, quinones, ac ati.

◆ Trefnu yn ôl siâp a maint

1) Colofn wydr: Y math o golofn cromatograffig a ddefnyddir yn gyffredin mewn labordai, gyda manteision tryloywder ac arsylwi hawdd. Mae maint y golofn wydr yn cael ei bennu yn ôl faint o ddeunydd sydd i'w wahanu a graddfa'r anhawster gwahanu, ac mae'r gymhareb diamedr i uchder yn gyffredinol rhwng 1: 8 ac 1:50.

2) Colofn Dur Di -staen: Mae gan golofn dur gwrthstaen fanteision ymwrthedd cyrydiad ac ymwrthedd pwysau, sy'n addas ar gyfer systemau cromatograffeg pwysedd uchel. Mae'r defnydd o golofnau dur gwrthstaen yn gymharol brin, ond mae ganddo fanteision mewn rhai amodau.

Mae dewis colofn cromatograffig addas yn hanfodol er mwyn gwahanu effeithiol. Wrth ddewis colofnau cromatograffig, mae angen ystyried y ffactorau canlynol:

Mae gan golofnau cromatograffig labordy ystod eang o gymwysiadau mewn nifer o feysydd, gan gynnwys ond heb fod yn gyfyngedig i'r canlynol:

◆ Gwahanu a phuro protein: Mae colofn cromatograffig yn un o'r offer pwysig ar gyfer gwahanu a phuro protein. Yn ôl gwahaniaeth maint protein, eiddo gwefru ac affinedd, gellir dewis gwahanol ddulliau cromatograffig ar gyfer gwahanu a phuro. Er enghraifft, mae cromatograffeg colofn cyfnewid ïon yn addas ar gyfer proteinau sydd wedi'u gwahanu gan eiddo gwefr; Mae cromatograffeg colofn affinedd yn defnyddio priodweddau rhwymo penodol i ynysu a phuro proteinau targed.

◆ Gwahanu asidau niwclëig: Gellir defnyddio colofnau cromatograffig hefyd ar gyfer gwahanu asidau niwclëig. Trwy ddulliau cromatograffig penodol, gellir gwahanu moleciwlau asid niwclëig o wahanol hyd a strwythurau (megis darnau DNA a moleciwlau RNA) yn effeithiol yn y golofn i ddiwallu anghenion dadansoddiad asid niwclëig dilynol, dilyniant ac arbrofion eraill.

◆ Gwahanu cyfansoddion moleciwl bach: Gellir gwahanu canolradd cyffuriau, cydrannau moleciwl bach mewn cynhyrchion naturiol, ac ati, gyda chymorth colofnau cromatograffig. Yn ôl gwahaniaeth cyfernod rhaniad rhwng cyfnod sefydlog a chyfnod symudol, gellir dewis dull cromatograffig addas ar gyfer gwahanu a phuro cyfansoddion moleciwl bach. Er enghraifft, mae gel silica cyfnod wedi'i wrthdroi yn addas ar gyfer gwahanu moleciwlau bach lipoffilig; Mae'r gel silica arferol yn addas ar gyfer gwahanu moleciwlau bach hydroffilig.

Gwahanu polysacaridau ffracsiynol: Gellir defnyddio'r golofn cromatograffig ar gyfer gwahanu polysacaridau yn ffracsiynol. Yn ôl maint moleciwlau polysacarid a strwythur cadwyn canghennog, gellir dewis technegau cromatograffig addas i wahanu cymysgeddau polysacarid i wahanol lefelau, sy'n ddefnyddiol i astudio ymhellach y berthynas rhwng strwythur a swyddogaeth polysacaridau.

◆ Ceisiadau eraill: Defnyddir colofnau cromatograffig yn helaeth hefyd wrth wahanu ac echdynnu cynhyrchion mewngellol ar ôl torri celloedd, gwahanu a phuro cydrannau gweithredol mewn darnau planhigion, gwahanu a phuro gwrthfiotigau, gwahanu a phuro ensymau, puro gwrthgyrff, a gwahanu a chrynodiad firws. Yn ogystal, mae'r golofn cromatograffig hefyd yn chwarae rhan bwysig wrth wahanu a dadansoddi cynhyrchion petrocemegol, gwahanu a chanfod ychwanegion bwyd, gwahanu a phuro deunyddiau crai cosmetig, dadansoddiad dosbarthu deunyddiau polymer a gwahanu a phuro sbeisys naturiol.