Cromatograffeg colofn troelli
Colofn 2.Chromatograffig (math cylchdro)
Colofn 3.Chromatograffig (Llawlyfr)
*** Rhestr brisiau ar gyfer y cyfan uchod, holwch ni i gael
Disgrifiad
Paramedrau technegol
Cromatograffeg colofn troelli,Fe'i gelwir yn gromatograffeg colofn allgyrchol yn Tsieineaidd, yn dechneg gwahanu bwysig ym maes biocemeg a bioleg foleciwlaidd. Mae'r dechneg yn cynnwys gosod colofn cromatograffeg fach mewn tiwb centrifuge a defnyddio grym allgyrchol yn lle disgyrchiant traddodiadol i gyflawni cromatograffeg gyflym o symiau bach o samplau. Defnyddir cromatograffeg colofn allgyrchol yn gyffredin ar gyfer cymwysiadau fel dihalwyno hidlo gel a chromatograffeg arsugniad, ac mae'n arbennig o addas ar gyfer trin samplau micro-gyfaint.
Baramedrau
Mewn cromatograffeg colofn allgyrchol, mae'r gymysgedd sampl yn cael ei wahanu gan rym allgyrchol trwy gyfnod llonydd a chyfnod symudol o fewn y golofn cromatograffeg. Mae'r cyfnod llonydd fel arfer yn cynnwys adsorbents fel gel silica ac alwmina, tra bod y cyfnod symudol yn doddydd hylif. Yn dibynnu ar gyfernodau rhaniad y cydrannau yn y sampl rhwng y cyfnod llonydd a'r cyfnod symudol, mae cyflymder symud y cydrannau yn y golofn yn amrywio, gan sylweddoli gwahanu'r cydrannau.
Defnyddir cromatograffeg colofn allgyrchol yn helaeth mewn biocemeg a bioleg foleciwlaidd oherwydd ei bod yn hawdd ei weithredu, cyflymder gwahanu cyflym a'r defnydd o sampl isel. Trwy ddewis cyfnodau llonydd a symudol priodol a optimeiddio amodau centrifugio, gall cromatograffeg colofn allgyrchol wahanu a phuro cyfansoddion targed yn effeithiol, gan ddarparu samplau o ansawdd uchel ar gyfer dadansoddiadau ac arbrofion biocemegol dilynol.
Biocemeg a bioleg foleciwlaidd
Echdynnu a phuro asid niwclëig:
Echdynnu DNA: Echdynnu DNA genomig o ansawdd uchel yn effeithlon o samplau biolegol fel celloedd, meinweoedd a gwaed.
Echdynnu RNA: Echdynnu Cyfanswm yr RNA neu fathau penodol o RNA, fel mRNA.
Puro DNA Plasmid: Puro DNA plasmid o ddiwylliannau bacteriol.
Glanhau Cynnyrch PCR: Tynnwch amhureddau fel primers, niwcleotidau ac ensymau o gynhyrchion PCR.
Puriad protein a pheptid:
Gan ddefnyddio cromatograffeg colofn allgyrchol, gellir gwahanu a phuro proteinau yn ôl eu priodweddau ffisiocemegol, megis maint, gwefr a hydroffiligrwydd.
Mae'n arbennig o addas ar gyfer puro proteinau olrhain, megis echdynnu proteinau targed o samplau biolegol cymhleth.
Tynnu moleciwlau bach a charbohydradau:
Wrth baratoi sampl, yn aml mae angen cael gwared ar amhureddau moleciwl bach a charbohydradau i wella purdeb ac ansawdd y sampl. Gall cromatograffeg colofn allgyrchol gyflawni'r nod hwn yn effeithiol.
Sampl sbectrometreg màs hylif cyn triniaeth:
Mewn dadansoddiad sbectrometreg màs hylifol, mae purdeb a chrynodiad y sampl yn hanfodol i'r canlyniadau dadansoddol. Gellir defnyddio cromatograffeg colofn allgyrchol ar gyfer puro neu rag-drin cyfeintiau bach o samplau (ee, 10 ul i 150 ul) ar gyfer sbectrometreg màs hylif i wella purdeb y sampl a chywirdeb y canlyniadau dadansoddol.
Ceisiadau eraill:
Gellir defnyddio cromatograffeg colofn allgyrchol hefyd mewn senarios arbrofol fel tynnu radiolabel, cyfieithu Nick, gwahanu affinedd, dihalwyno, ac amnewid byffer.
Yn ogystal, defnyddiwyd cromatograffeg colofn allgyrchol yn helaeth yn y diwydiant biotechnoleg ar gyfer echdynnu a phuro cynhwysion sy'n weithredol yn fiolegol wrth ddatblygu a chynhyrchu biofferyllol oherwydd ei fod yn hawdd ei weithredu, cyflymder gwahanu cyflym a defnydd sampl isel.
Esboniad o'r broses buro a'i arwyddocâd
Mae cromatograffeg colofn troelli yn chwarae rhan hanfodol wrth buro proteinau a pheptidau.
Phroses buro
Paratoi sampl:
Yn gyntaf, mae cymysgedd sy'n cynnwys y protein targed neu'r peptid yn cael ei dynnu o'r sampl fiolegol.
Efallai y bydd angen i'r sampl gael rhai camau cyn triniaeth fel tynnu amhureddau fel deunydd gronynnol, lipidau ac asidau niwcleig i wella effeithlonrwydd puro.
Dewis a llwytho colofnau allgyrchol:
Dewiswch golofn allgyrchol addas yn seiliedig ar briodweddau ffisiocemegol y protein targed neu'r peptid. Gall cyfnodau llonydd ar gyfer colofnau allgyrchol gynnwys geliau o wahanol feintiau mandwll, ligandau affinedd, neu fathau eraill o adsorbents.
Llwythwch y cyfnod llonydd i'r golofn centrifugation a sicrhau ei fod wedi'i ddosbarthu'n gyfartal.
Llwytho sampl a centrifugio:
Llwythwch y sampl pretreated ar y golofn centrifuge.
Centrifuge y golofn gan ddefnyddio centrifuge i berfformio gweithrediad centrifugation i basio'r sampl trwy'r cyfnod llonydd o dan rym allgyrchol.
ELUTUTION A CASGLU:
Mae'r golofn centrifugation yn cael ei echdynnu gan ddefnyddio elifiant priodol i echdynnu'r protein targed neu'r peptid o'r cyfnod llonydd.
Casglwch yr elît, a all gynnwys proteinau targed purdeb uchel neu beptidau.
Prosesu pellach:
Os dymunir, gall yr elît a gasglwyd fod yn destun prosesu ymhellach, megis canolbwyntio, dihalwyno, neu amnewid clustogi.
Arwyddocâd
Gwell purdeb:
Mae cromatograffeg colofn allgyrchol yn tynnu amhureddau o'r sampl yn effeithiol, megis moleciwlau bach, proteinau eraill, asidau niwclëig, ac ati, a thrwy hynny gynyddu purdeb y protein targed neu'r peptid.
Cyflym ac Effeithlon:
O'i gymharu â'r dechnoleg cromatograffeg draddodiadol, mae gan gromatograffeg colofn allgyrchol fanteision gweithredu'n hawdd a chyflymder gwahanu cyflym. Gall brosesu nifer fawr o samplau mewn amser byr, sy'n addas ar gyfer sgrinio a pharatoi trwybwn uchel.
Arbed sampl:
Mae angen llai o gyfaint sampl ar gromatograffeg colofn allgyrchol ac mae'n addas ar gyfer puro samplau olrhain. Mae hyn yn arbennig o bwysig ar gyfer samplau biolegol gwerthfawr neu broteinau a pheptidau anodd eu bod.
Amddiffyn gweithgaredd protein:
Yn ystod cromatograffeg colofn allgyrchol, gellir amddiffyn gweithgaredd y protein targed neu'r peptid trwy ddewis yr amodau cyfnod llonydd ac elution priodol. Mae hyn yn helpu i gynnal eu swyddogaeth fiolegol a'u cyfanrwydd strwythurol.
Ceisiadau mewn Ymchwil a Chynhyrchu:
Mae gan gromatograffeg colofn allgyrchol ystod eang o gymwysiadau mewn biocemeg, bioleg foleciwlaidd, biotechnoleg a meysydd eraill. Gellir ei ddefnyddio nid yn unig ar gyfer puro samplau mewn arbrofion ymchwil wyddonol, ond hefyd ar gyfer echdynnu a phuro cynhwysion sy'n weithredol yn fiolegol wrth ddatblygu a chynhyrchu cyffuriau biolegol.
Mae purdeb protein yn hynod bwysig i ymchwil fiolegol
Mewn ymchwil fiolegol, mae proteinau targed fel arfer yn cael eu cymysgu ag amrywiaeth o broteinau ac amhureddau eraill. Gall cael gwared ar y cydrannau di-darged hyn trwy'r broses buro sicrhau penodoldeb a chywirdeb arbrofion dilynol. Gall samplau protein purdeb uchel leihau ffactorau sy'n ymyrryd mewn arbrofion, gan wneud y canlyniadau'n fwy dibynadwy.
Gall amhureddau effeithio ar weithgaredd protein neu achosi diraddio protein. Mae'r broses buro yn dileu'r sylweddau niweidiol hyn, gan arwain at broteinau â gweithgaredd biolegol uchel. Mae hyn yn arbennig o bwysig ar gyfer darganfod cyffuriau a chymwysiadau biotechnoleg, gan fod gweithgaredd protein yn pennu ei swyddogaeth a'i effaith yn yr organeb yn uniongyrchol.
Mewn ymchwil biofeddygol, yn aml mae angen astudio strwythur, swyddogaeth a rhyngweithio proteinau penodol. Samplau protein purdeb uchel yw'r sylfaen ar gyfer yr astudiaethau hyn. Trwy'r broses buro, gellir cael digon o broteinau targed i ddiwallu'r anghenion ymchwil hyn. Mae hyn o arwyddocâd mawr ar gyfer datgelu mecanweithiau rheoleiddio proteinau mewn organebau, rôl afiechydon yn y broses o ddatblygu afiechydon, ac ati.
Mae technegau puro uwch wedi gwella cynnyrch a gweithgaredd proteinau, gan hyrwyddo datblygiadau arloesol mewn ymchwil feddygol a chymwysiadau diwydiannol. Mae gwelliannau parhaus mewn dulliau puro yn galluogi cynhyrchu proteinau o ansawdd uchel yn fwy effeithlon, cost-effeithiol a graddadwy, gan yrru arloesedd a darganfod mewn ystod eang o feysydd gwyddonol. Er enghraifft, mewn datblygiad biofferyllol, mae puro proteinau yn gam hanfodol wrth ddatblygu a chynhyrchu cyffuriau. Gall cyffuriau protein purdeb uchel leihau sgîl -effeithiau ac ymatebion imiwnedd a gwella diogelwch ac effeithiolrwydd cyffuriau.
Yn ogystal ag ymchwil biofeddygol, mae purdeb protein hefyd yn bwysig mewn senarios cymhwysiad eraill. Er enghraifft, wrth fonitro amgylcheddol, gellir defnyddio biosynhwyryddion sy'n seiliedig ar brotein i ganfod llygryddion; Yn y diwydiant bwyd a cholur, oherwydd y risg o adweithiau alergaidd, rhaid i gynnwys proteinau ac amhureddau fodloni rhai safonau diogelwch. Mae'r senarios cymhwysiad hyn hefyd yn gofyn am samplau protein purdeb uchel i sicrhau cywirdeb a dibynadwyedd.
I grynhoi, mae purdeb protein yn hynod bwysig ar gyfer ymchwil fiolegol. Mae nid yn unig yn gysylltiedig â phenodoldeb a chywirdeb arbrofion, ond mae hefyd yn effeithio'n uniongyrchol ar weithgaredd biolegol a chywirdeb cemegol proteinau. Felly, mewn ymchwil fiolegol, rhaid pwysleisio'r broses buro o broteinau i sicrhau dibynadwyedd a gwyddonol y canlyniadau arbrofol.
Tagiau poblogaidd: cromatograffeg colofn troelli, gweithgynhyrchwyr cromatograffeg colofn troelli llestri, cyflenwyr, ffatri
Anfon ymchwiliad
