Cromatograffeg Colofn HPLC
Colofn 2.Chromatograffig (math cylchdro)
Colofn 3.Chromatograffig (Llawlyfr)
*** Rhestr brisiau ar gyfer y cyfan uchod, holwch ni i gael
Disgrifiad
Paramedrau technegol
Cromatograffeg Colofn HPLC, a elwir hefyd yn gromatograffeg hylif perfformiad uchel (cromatograffeg hylif perfformiad uchel), yn gromatograffeg hylif colofn gydag effeithlonrwydd gwahanu uchel, ac mae hefyd yn gangen bwysig o gromatograffeg.
Mae'n gwahanu'r cydrannau yn y sampl yn ôl y gwahaniaeth mewn grym arsugniad a chyfernod rhaniad rhwng y cyfnod sefydlog a'r cyfnod symudol. Mae system trwythiad pwysedd uchel, cyfnod symudol (fel arfer toddydd sengl neu gymysgedd o doddyddion â pholaredd gwahanol) yn cael ei bwmpio i golofn sy'n cynnwys cyfnod llonydd. Pan fydd pob cydran yn y sampl yn mynd trwy'r golofn cromatogram, oherwydd gwahanol faint a chryfder y rhyngweithio â'r cyfnod llonydd (megis arsugniad, dosbarthiad, gwahardd, affinedd), mae'r amser preswylio yn y cyfnod llonydd hefyd yn wahanol, er mwyn cyflawni gwahaniad pob cydran. Yna mae'r cydrannau sydd wedi'u gwahanu yn mynd i mewn i'r synhwyrydd i'w canfod, a thrwy hynny gael gwybodaeth ansoddol a meintiol o bob cydran.
Baramedrau
Cymwysiadau mewn Dadansoddiad Fferyllol
Cymhwyso cromatograffeg colofn HPLC wrth ddadansoddi cyffuriau
Fel technoleg dadansoddi gwahanu pwysig, mae cromatograffeg hylif perfformiad uchel (HPLC) wedi dangos potensial a gwerth cymhwysiad gwych ym maes dadansoddiad fferyllol ers ei ddatblygiad cyflym yn y 1970au. Gan gyfuno egwyddorion gwahanu cromatograffeg hylif clasurol a chromatograffeg nwy, mae HPLC wedi dod yn offeryn anhepgor wrth ddadansoddi cyffuriau ar gyfer ei wahanu effeithlon, dadansoddiad cyflym, sensitifrwydd canfod rhagorol ac ystod eang o gymwysiadau.
Egwyddorion a nodweddion sylfaenol
Mae'n defnyddio rhyngweithiad y cyfnodau sefydlog a symudol i wahanu'n raddol wahanol gydrannau'r gymysgedd. Gall y cyfnod llonydd fod yn solid neu'n hylif ynghlwm wrth solid, tra bod y cyfnod symudol yn hylif neu'n nwy. Yn HPLC, mae'r toddydd yn cael ei orfodi trwy'r golofn ar bwysau uchel o hyd at gannoedd o atmosfferau, gan wella'r effeithlonrwydd gwahanu yn fawr. Yn ôl y gwahanol fecanwaith gwahanu, gellir rhannu HPLC yn gyfnod arferol HPLC, cam gwrthdroi HPLC, cyfnewid ïon HPLC ac allgáu cyfaint HPLC. Mae gan bob math ei gwmpas cymhwysiad penodol a'i fecanwaith gwahanu, megis cyfnod arferol HPLC i wahanu dadansoddiadau yn seiliedig ar bolaredd, a chyfnod gwrthdroi HPLC i wahanu gan ddefnyddio rhyngweithiadau hydroffobig.
Mae nodweddion cromatograffeg colofn HPLC yn cael eu hadlewyrchu'n bennaf yn yr agweddau canlynol:
Effeithlonrwydd Gwahanu Uchel: Mae HPLC yn galluogi gwahanu cymysgeddau cymhleth yn effeithlon diolch i bympiau trwyth pwysedd uchel a cholofnau perfformiad uchel.
Sensitifrwydd uchel: Mae synwyryddion modern, fel synwyryddion amsugno uwchfioled, synwyryddion fflwroleuedd, synwyryddion sbectrometreg màs, ac ati, yn golygu bod gan HPLC sensitifrwydd canfod uchel iawn.
Ystod eang o gymwysiadau: Nid yw HPLC wedi'i gyfyngu gan anwadalrwydd a sefydlogrwydd thermol y sampl, a gall ddadansoddi sylweddau gweithredol ffisiolegol ansefydlog thermol gyda berwbwynt uchel ac nid yw'n hawdd eu hanweddu.
Gradd uchel o awtomeiddio: Mae gan y mwyafrif o offerynnau HPLC modern brosesydd samplwr a data awtomatig, a all wireddu awtomeiddio dadansoddiad a phrosesu data cyflym.
 |
 |
 |
 |
Cymhwysiad penodol wrth ddadansoddi cyffuriau
Gellir defnyddio HPLC ar gyfer dadansoddi cyfansoddiad cyffuriau i bennu cynhwysion actif ac amhureddau niweidiol cyffuriau. Er enghraifft, trwy ddadansoddi flavonoidau, alcaloidau a chynhwysion actif eraill mewn deunyddiau meddyginiaethol Tsieineaidd, gellir pennu mathau a chynnwys cynhwysion actif i sicrhau ansawdd ac effeithiolrwydd cyffuriau. Yn ogystal, gellir defnyddio HPLC hefyd ar gyfer dadansoddi cyfansoddiad cyffuriau ar ffurfiau dos fferyllol y Gorllewin, megis pigiadau, tabledi, capsiwlau, ac ati, i sicrhau bod cyfansoddiad y cyffuriau yn y cyffur yn cwrdd â'r gofynion penodedig.
Mae HPLC yn chwarae rhan bwysig wrth bennu crynodiad cyffuriau. Trwy bennu'r cynnwys cyffuriau yn union mewn cyffur, gellir sicrhau diogelwch ac effeithiolrwydd y cyffur. Er enghraifft, wrth ddadansoddi cyffuriau gwrthfiotig, gellir defnyddio HPLC i bennu cynnwys gwrthfiotig y cyffur i werthuso effaith gwrthfacterol y cyffur. Yn ogystal, gellir defnyddio HPLC hefyd i bennu crynodiad y cyffuriau mewn organebau, megis plasma, wrin, meinwe a samplau biolegol eraill, i werthuso effeithiolrwydd ac adweithiau niweidiol cyffuriau.
Mae HPLC hefyd yn chwarae rhan bwysig mewn gwerthuso ansawdd cyffuriau. Trwy gymharu data dadansoddol gwahanol sypiau o gyffuriau, mae'n bosibl gwerthuso a yw ansawdd cyffuriau yn sefydlog. Yn ogystal, gellir defnyddio HPLC hefyd i astudio effeithiolrwydd a nodweddion ffarmacocinetig cyffuriau newydd, gan ddarparu sylfaen wyddonol ar gyfer datblygu a marchnata cyffuriau newydd. Er enghraifft, yng nghyfnod datblygu cyffuriau newydd, gall HPLC bennu amsugno, dosbarthu, metaboledd ac ysgarthiad cyffuriau newydd mewn anifeiliaid, er mwyn deall effeithiolrwydd a nodweddion ffarmacocinetig cyffuriau newydd, a darparu cefnogaeth gref ar gyfer treialon clinigol a chymwysiadau marchnata cyffuriau newydd.
Mae cyffuriau cylchol yn cyfeirio at foleciwlau cyffuriau gyda chanolfannau cylchol, a gall eu enantiomers amrywio'n sylweddol o ran gweithgaredd, metaboledd a gwenwyndra. Felly, mae'n arwyddocâd mawr i ynysu a phenderfynu ar enantiomers cyffuriau cylchol. Mae'r cromatograffeg hon yn chwarae rhan bwysig wrth ddadansoddi cyffuriau cylchol. Trwy gyflwyno cyfnod llonydd cylchol neu ychwanegyn cyfnod symudol cylchol, gellir gwahanu a phennu enantiomers cyffuriau cylchol yn effeithiol. Er enghraifft, ar gyfer cyffuriau asid amino gweithredol yn optegol, gall gwahanol enantiomers gael eu gwahanu a'u pennu gan y cromatograffeg hon i werthuso gweithgaredd biolegol a gwenwyndra'r cyffur.
Daw meddyginiaethau naturiol o ystod eang o ffynonellau gyda chyfansoddiadau cymhleth a gallant gynnwys amrywiaeth o gyfansoddion bioactif. Mae cromatograffeg y golofn yn chwarae rhan bwysig wrth ddadansoddi cyffuriau naturiol. Trwy optimeiddio amodau cromatograffig a dewis y cyfnod symudol addas, gellir gwireddu gwahanu a phenderfynu cydrannau gweithredol mewn meddyginiaethau naturiol yn effeithlon. Er enghraifft, defnyddiwyd y dull cromatograffeg hwn i wahanu a phenderfynu ar gydrannau gweithredol meddygaeth lysieuol Tsieineaidd, fel flavonoidau a saponinau, i ddeall eu mathau a'u cynnwys, ac i ddarparu cefnogaeth gref ar gyfer rheoli, datblygu a defnyddio ansawdd meddygaeth lysieuol Tsieineaidd.
Manteision a heriau cromatograffeg colofn HPLC wrth ddadansoddi cyffuriau
Mae gan y dull cromatograffig fanteision effeithlonrwydd gwahanu uchel, sensitifrwydd uchel, ystod cymhwysiad eang a lefel uchel o awtomeiddio wrth ddadansoddi cyffuriau. Fodd bynnag, wrth gymhwyso'n ymarferol, mae hefyd yn wynebu rhai heriau. Er enghraifft, mae pretreatment y sampl yn feichus iawn i sicrhau purdeb a sefydlogrwydd y sampl; Costau dadansoddol uchel, gan gynnwys caffael offerynnau, cynnal a chadw, defnydd cromatograffig a chyfnod symudol; Yn ogystal, ar gyfer rhai cydrannau â pholaredd cryf neu bwysau moleciwlaidd mawr, efallai na fydd HPLC yn gallu gwahanu na chanfod yn wael yn llwyr. Felly, mewn cymwysiadau ymarferol, dylid dewis y dull dadansoddi mwyaf priodol yn unol â gofynion ansawdd cyffuriau penodol a'r sefyllfa wirioneddol.
Rhagolwg yn y dyfodol
Gyda chynnydd gwyddoniaeth a thechnoleg a datblygu technoleg cromatograffeg hylif perfformiad uchel, bydd ei gymhwysiad wrth ddadansoddi cyffuriau yn fwy eang. Ar y naill law, bydd datblygu deunyddiau cyfnod llonydd newydd yn ehangu ystod cymhwysiad cromatograffeg hylif perfformiad uchel yn fawr ac yn gwella effeithlonrwydd gwahanu a detholusrwydd. Ar y llaw arall, bydd offerynnau HPLC yn fwy deallus ac awtomataidd, gan fonitro statws colofn mewn amser real trwy synwyryddion integredig, gan alluogi cynnal a chadw rhagfynegol, lleihau amser segur, ac optimeiddio prosesau arbrofol. Yn ogystal, ynghyd â thechnoleg dadansoddi data mawr, gall y system addasu'r paramedrau gweithredu yn awtomatig i gyd -fynd ag amodau gwahanu gorau gwahanol samplau, gan wella effeithlonrwydd arbrofol a dibynadwyedd y canlyniadau. Bydd y datblygiadau hyn yn darparu offer dadansoddol mwy effeithlon, cywir a dibynadwy ar gyfer dadansoddi cyffuriau, gan yrru datblygiad darganfod cyffuriau a rheoli ansawdd.
I grynhoi, mae'r math hwn o gromatograffeg yn chwarae rhan bwysig mewn dadansoddi cyffuriau ac mae ganddo ragolygon cymwysiadau eang. Trwy optimeiddio amodau cromatograffig yn barhaus, dewis cyfnodau symudol a llonydd addas, cyflwyno technolegau ac offer canfod newydd, gwella ei gywirdeb a'i ddibynadwyedd ymhellach wrth ddadansoddi cyffuriau, a darparu cefnogaeth fwy pwerus ar gyfer datblygu cyffuriau, rheoli ansawdd a defnyddio cyffuriau clinigol.
Teilyngdod a Demerits
Manteision
Gwahanu effeithlon
Mae cromatograffeg colofn HPLC yn defnyddio pwmp trwyth pwysedd uchel a chyfnod llonydd effeithlonrwydd uchel, sy'n gwneud effeithlonrwydd colofn yn llawer uwch na chromatograffeg hylifol clasurol, a gall wireddu gwahanu cymysgeddau cymhleth yn effeithlon.
Sensitifrwydd uchel
Yn meddu ar synwyryddion sensitifrwydd uchel, fel synwyryddion uwchfioled, synwyryddion fflwroleuedd, ac ati, gall canfod crynodiadau isel o samplau, sy'n arbennig o bwysig ar gyfer dadansoddi olrhain.
A ddefnyddir yn helaeth
Nid yw wedi'i gyfyngu gan anwadalrwydd a sefydlogrwydd thermol y sampl, a gall ddadansoddi'r deunydd organig gyda berwbwynt uchel, sefydlogrwydd thermol gwael a màs moleciwlaidd cymharol fawr, ac mae ganddo ystod eang o gymwysiadau.
Dewis da
Mae yna lawer o fathau o gyfnod symudol, a gellir gwella detholusrwydd gwahanu trwy newid math a chyfansoddiad y cyfnod symudol i fodloni gofynion dadansoddol gwahanol samplau.
Gradd uchel o awtomeiddio
Mae gan y mwyafrif o offerynnau HPLC modern brosesydd samplwr a data awtomatig, a all wireddu awtomeiddio dadansoddiad a gwella effeithlonrwydd dadansoddi.
Mae adferiad sampl yn hawdd
Nid yw'r sampl yn cael ei dinistrio ar ôl pasio trwy'r golofn, a gellir casglu neu baratoi un gydran, sy'n gyfleus ar gyfer arbrofion neu gymwysiadau dilynol.
Ddiffygion
Mae prisiau a chostau cynnal a chadw dyddiol cromatograffau hylifol yn uchel, gan gynnwys amnewid colofnau, bwyta cyfnod symudol a graddnodi'r offeryn yn rheolaidd.
Er eu bod yn gyflymach na chromatograffeg hylif clasurol, mae amseroedd dadansoddi HPLC yn dal i fod yn gymharol hir o gymharu â chromatograffeg nwy, yn enwedig ar gyfer gwahanu a dadansoddi samplau cymhleth.
Er bod offerynnau HPLC yn awtomataidd iawn, mae angen lefel benodol o arbenigedd a phrofiad ar gyfer gweithredu a chynnal yr offerynnau o hyd. Yn ogystal, gall cyn-brosesu samplau fod yn gymhleth.
Oherwydd arsugniad anghildroadwy rhai cyfansoddion ar y cyfnod llonydd, ni chaniateir canfod y cyfansoddion hyn yn effeithiol, gan effeithio ar gywirdeb y dadansoddiad.
Mae gwahanu LC yn aml yn cael ei ddylanwadu'n fawr gan dymheredd y golofn, ac mae angen cynnal amodau tymheredd cyson er mwyn cael canlyniadau ailadroddadwy, sy'n cynyddu cymhlethdod a chost yr arbrawf.
Rhagofalon wrth bennu cynnwys cyffuriau
 |
 |
 |
Mae gan y dull hwn lawer o ragofalon ar gyfer pennu cynnwys cyffuriau, sy'n bwysig iawn i sicrhau cywirdeb a dibynadwyedd y canlyniadau penderfynu. Dyma rai ystyriaethau allweddol:
Bydd gwahaniaeth y golofn yn effeithio ar ymddygiad cadw'r cyffur, hyd yn oed os gall hyd y golofn, diamedr mewnol, maint gronynnau'r un golofn, oherwydd gwahanol briodweddau'r llenwr, amser cadw a math brig y cyffur fod yn wahanol iawn. Felly, dylid dewis y golofn briodol yn ôl priodweddau'r cyffur a'r anghenion gwahanu.
Dylai'r golofn gael ei chynnal yn rheolaidd er mwyn osgoi halogi a rhwystr i sicrhau ei pherfformiad gwahanu da.
Mae pH halen byffer y cyfnod symudol yn cael effaith sylweddol ar ymddygiad cadw cyffuriau a gall hyd yn oed newid trefn uchafbwynt rhai cyffuriau. Felly, wrth optimeiddio'r cyfnod symudol, dylid rhoi sylw arbennig i werth pH yr halen byffer.
Mae cyfansoddiad y cyfnod symudol hefyd yn effeithio ar effaith gwahanu'r cyffur. Er enghraifft, wrth bennu paratoadau amlfitamin, bydd newidiadau yn y gymhareb gymharol o sodiwm hecsanesulfonate a sulfonate sodiwm heptane yn y cyfnod symudol yn effeithio ar amser cadw a siâp brig pob cydran. Felly, dylid dewis y cyfansoddiad cam symudol priodol yn ôl natur y cyffur a'r anghenion dadansoddol.
Dylai'r broses trin sampl sicrhau cynrychiolaeth a sefydlogrwydd y sampl er mwyn osgoi diraddio neu halogi'r sampl yn ystod y prosesu.
Wrth bwyso a mesur y sampl, dylid defnyddio'r dull ychwanegyn i'w bwyso yn ei le ar un adeg i sicrhau cywirdeb y pwyso. Ar yr un pryd, dylid safoni'r gweithrediad pwyso er mwyn osgoi gollyngiadau.
Mae ansawdd y sylwedd cyfeirio yn cael dylanwad uniongyrchol ar ganlyniad i benderfyniad cynnwys. Felly, dylid dewis ansawdd y cynnwys dibynadwy, cywir.
Dylid storio cynhyrchion rheoli yn ôl yr angen er mwyn osgoi diraddio neu halogi. Os cedwir y cynnyrch rheoli yn yr oergell, dylid ei gynhesu yn y popty sychu cyn pwyso.
Dylid dewis y math synhwyrydd priodol yn unol â natur yr anghenion cyffuriau a dadansoddol, megis synhwyrydd uwchfioled, synhwyrydd fflwroleuedd, ac ati.
Dylai'r synhwyrydd gael ei raddnodi o bryd i'w gilydd i sicrhau cywirdeb ei ganlyniadau mesur.
Dadansoddiad ystadegol rhesymol o'r data mesur i sicrhau dibynadwyedd ac ailadroddadwyedd y canlyniadau. Er enghraifft, gellir cyfrifo gwyriad safonol cymharol (RSD) yr ardal brig i werthuso manwl gywirdeb y canlyniadau mesur.
Wrth gyfrifo cynnwys, dylid defnyddio dulliau dibynadwy fel safonau allanol neu fewnol, a dylid sicrhau llinoledd y gromlin safonol.
Wrth sefydlu dull penderfynu cynnwys newydd, dylid dilysu methodolegol, gan gynnwys penodoldeb, llinoledd, ystod, manwl gywirdeb, cywirdeb, gwydnwch ac ati.
Mae dilysu methodolegol yn fodd pwysig o sicrhau bod y dull mesur yn wyddonol, yn rhesymol ac yn ddibynadwy.
Sicrhewch fod yr offeryn yn parhau i fod yn sefydlog yn ystod y broses ddadansoddi, yn enwedig wrth berfformio dadansoddiad aml-bin, rhowch sylw i arsylwi a yw gwerth ymateb a siâp brig yr offeryn yn sefydlog.
Os bydd data annormal yn digwydd yn ystod y broses ddadansoddi, dylid ei wirio a'i ddileu yn ofalus, a'i ail-ddadansoddi os oes angen.
Tagiau poblogaidd: Cromatograffeg Colofn HPLC, gweithgynhyrchwyr cromatograffeg colofn HPLC China, cyflenwyr, ffatri
Anfon ymchwiliad
